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[size=2]本人3’端已经测出来了,现在做5‘端,却怎么也扩不出来。5'RACE做了两轮pcr,用的都是以下程序:即1、94度2分钟。2、94度30秒,72度3分钟,5cycle。3、94度 30秒,70度30秒,72度3min,5
2015年08月05日发布人:月牙牙
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[size=2][font=黑体]新年伊始,万象更新,特别推出Waters软件应用问题解答专贴,欢迎大家提问,偶将尽力回答。并在适当的时候总结归纳出专题。[/font][/size],[size=2]我来请教第一个问题,可否把Breeze的图谱文件夹任意设大小(如硬盘大小),我的好象几百兆就满了
2015年03月30日发布人:@花开花落@
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,1min可以不?我的5'end预计不会超过1K。
2、是否怀疑模板的问题?用的oligodG接头。有听说做单引物不用接头效果也很好,下次想试试。
3、稀释度或者稀释操作出问题?
4、还是不用touchdown,做一做Tm梯度跑跑引物来做
2014年09月24日发布人:04906
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吸光度大于1的数据有效吗?可以发表吗?我的浓度很稀,10的负5次方,还是没想到吸光度还是大于1了,差点到2,如果只是作为波谱图进行发表,只要重复性好就行。
如果要用那个吸光度进行定量,就需要做相关的线性检验了。,这个不好说,做个线性看看
2009年11月21日发布人:财富思考
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[/color][/size],[size=4]我刚做过5’、3‘ RACE,我个人的经验如下:
1、首先,提的RNA必须完整,最好跑个RNA电泳来验证一下;
2、设计引物时要注意:Tm最好大于70度,两引物间要有100-200bp的重叠区
2011年09月27日发布人:幽兰君
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=1652861&sty=1&tpg=1&age=0 [/size],[size=4]Primer 5.0 安装程序2.71M,安装完毕后运行sysedit,在win.ini中将[win32]的参数由vspace=DU改为vspace=PU
2011年10月20日发布人:vivian4123
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primer premier 5是个不错的软件,可是在WinXP下好像不工作,是因为**版的原因还是软件本身的原因,请高手指教,谢谢![/size],[size=2]
可以在XP下使用,我的是同学在网上下后给我的
2015年12月01日发布人:月牙牙
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展开剂石油醚:乙酸乙酯5:1, rf值0.2和0.4的两个物质上柱子用什么比例洗脱,用20:1吧!,把展开剂的极性调小一些,可以增加石油醚的比例,你可以尝试一下10:1,把Rf0.2的那个点压到Rf基本为零,先把前面那个点冲下来;前面的点
2011年04月01日发布人:duxin_30
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[color=Black][font=楷体_GB2312][b][size=4][精华]】RealTimePCR问题专贴--请先看P1的问题汇总
开个帖子,有定量PCR相关的问题可以提问,如果有类似/雷同的问题我会整理在一起
2011年10月16日发布人:潇湘子
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最近实验室要用一株神经细胞做实验,原代培养太麻烦,所以选择了SH-SY5Y这株细胞,从上海细胞所购买回来了,培养状态一直很差,用DMEM/F12培养基,没添加额外的L-Gln和双
2012年02月11日发布人:moonlight45